Cromatografía
La cromatografía es un método físico de separación en el que los
componentes que se han de separar se distribuyen entre dos fases, una de
las cuales está en reposo mientras que la otra se mueve en una dirección definida.
Existen varios métodos para hacer una cromatografía, pero sólo vamos a mostrar los siguientes:
Cromatografía en Placas.
En la cromatografía con placas la fase estacionaria o también llamada, absorbente,
se encuentra colocada uniformemente, formando una finísima capa de un
espesor en torno a 0.1 mm, sobre un soporte o placa de vidrio o metal.
La mezcla que deseamos analizar se colocará a una corta distancia del
borde inferior de la mencionada placa, la cual introduciremos en una
cubeta o recipiente que contendrá la fase móvil, o también llamado,
eluyente. La fase móvil irá ascendiendo poco a poco sobre la placa de la
fase estacionaria a través de capilaridad, desplazando a los diferentes
componentes de la mezcla a analizar, a distintas velocidades, lo que
provocará la separación de la mezcla.
Para la separación de las sustancias pasa algo llamado polaridad. Ésta se nota cuando los compuestos son atraídos o jalados por el disolvente hacia arriba por medio de vapor, los que no son polares se quedan en el fondo.
Cromatografía en Columna.
En este tipo de cromatografía, la fase estacionaria utilizada, es decir, el absorbente,
se coloca en el interior de una columna de vidrio, la cual finaliza con
una llave para controlar el paso de sustancias al exterior de la
columna. La fase estacionaria se impregna con el eluyente o fase móvil.
Seguidamente la mezcla orgánica que nos interesa separar la depositamos
por la parte superior de la fase estacionaria, y así la fase móvil podrá
ir atravesando el sistema.
Los compuestos que se encuentran disueltos en la fase móvil,
poco a poco saldrán de la columna cromatográfica, y se recogen en
fracciones. Las fracciones menos polares, que son por lo general las que
se retienen poco o nada en el absorbente, serán las primeras en salir
de la columna. En cambio, las sustancias más polares, quedan retenidas
por más tiempo en el absorbente, y a menudo es necesario el uso de
diferentes disolventes con la finalidad de incrementar su polaridad para
que sean arrastradas por estos.
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